Fundado en 1611 por Margarita de Austria, cerca del Alcázar (al que estaba conectado por un pasaje), este convento desde entonces se benefició de la esplendidez de la familia real: de ahí su hermosa colección de obras de arte y, en particular, obras de la escuela madrileña del siglo XVII y, sobre todo, una impresionante colección de reliquias: hay más de 1 500, entre las cuales la de San Pantaleón: la sangre de este émulo madrileño de San Genaro se licúa cada 27 de julio.